TORO LALAN'NY
Cellulose acetate film electrophoresis dia fomba electrophoresis mampiasa sarimihetsika cellulose acetate ho fanohanana. Ny trangan-javatra izay nivezivezena ny singa voampanga mankany amin'ny electrode mifanohitra amin'ny asan'ny saha elektrika dia antsoina hoe electrophoresis. Koa satria ny proteinina tsirairay dia manana teboka isoelektrika manokana, raha misy proteinina apetraka ao anaty vahaolana miaraka amin'ny pH ambany noho ny teboka isoelektrika, ny proteinina dia ho voampanga tsara ary hifindra mankany amin'ny electrode ratsy. Mifanohitra amin'izany, dia mikisaka mankany amin'ny tsato-kazo tsara. Satria ny hafainganam-pandehan'ny molekiola proteinina mihetsika ao anaty saha elektrika dia mifandray amin'ny fiampangana azy, ny endrika sy ny haben'ny molekiola, ny proteinina samihafa dia azo sarahina amin'ny alàlan'ny electrophoresis. Ny serum dia misy proteinina isan-karazany, izay samy manana teboka isoelektrika amin'ny pH7.5 na latsaka. Rehefa apetraka ao amin'ny buffer pH 8.6 ny serum mba hampandehanana electrophoresis, ny proteinina serum rehetra dia misy fiampangana ratsy ary hifindra mankany amin'ny lafiny tsara amin'ny sehatry ny herinaratra. Satria ny proteinina serum isan-karazany dia manana fiampangana samy hafa amin'ny pH mitovy, ny molekiolan'ny molekiola dia tsy mitovy amin'ny habeny, ary noho izany dia hafa ny hafainganam-pandehan'ny fifindra-monina, ary misaraka amin'ny electrophoresis izy ireo. Ny teboka isoelectric sy ny lanjan'ny molekiola amin'ny proteinina serum dia aseho amin'ny tabilao etsy ambany:
proteinina | Isoelectric teboka (PI) | lanjan'ny molekiola |
zavatra mampandry ra | 4.88 | 69 000 |
α1-gloulin | 5.00 | 200 000 |
α2-gloulin | 5.06 | 300 000 |
β-gloulin | 5.12 | 9 000~150 000 |
γ-gloulin | 6.85–7.50 | 156 000~ 300 000 |
Ny fanandramana dia ny manasaraka proteinina samihafa ao amin'ny serum-dra miaraka amin'ny cellulose acetate membrane (abbr. CAM) ho media fanohanana. Ny CAM dia karazam-bolo misy foamesarimihetsika miaraka amin'ny fanamiana tsara, ary ny hateviny dia 0.1mm-1.5mm, izay misy rano mitroka.
Fitaovana, fitaovana ary reagents ho an'ny CAM Electrophoresis
Santionany:salama ra olombelona serum
fitaovana:famatsiana herinaratra DYY-6C, tanky electrophoresis DYCP-38C, santionany ambony loading WD-9404
Ny reagents
1) cellulose acetate membrane 7X9cm
2) PH 8.6 barbitol buffer vahaolana (ionic hery 0.05-0.09, izany dia 0.06tid fotoana.): maka 1,84g Diethyl barbituric asidra, ary avy eo dia maka 1.03g Diethyl ny sodium pentobarbital, ampio ny sasany distilled rano mba hanafanana mba levona, ary ataovy. hatramin'ny 1000 ml;
3) Tasy: Ponceau S 0.2g, Trichloroacetic 3g, ampio rano voadio 100ml;
4) TBS/T na PBS/T: 45ml 95% ethanol, 5ml glacial acetic asidra, ampio 50ml distilled rano;
5) Vahaolana fanadiovana: 70ml anhydrous ethanol, 30ml glacial acetic asidra.
Fomba fanandramanad
1) Omano ny fonon-tanana: Atsoboka ao anaty barbitol buffer solution 30min-8h, ary ento mivoaka, esory ny vahaolana fanampiny amin'ny taratasy absorbent.
2) Loading santionany: manavaka ny lafiny marokoroko sy malama ny membrane, ary asio tsipika amin'ny 1.5cm halavirana amin'ny farany ambony amin'ny lafiny marokoroko. Ampidiro ny santionany amin'ny alàlan'ny fitaovana fametahana santionany ambony amin'ny lafiny ratsy. Fanamarihana: Ny santionany dia tokony hapetraka eo amin'ny sisin'ny membrane. Aorian'ny fidiran'ny santionany amin'ny serum ao anaty membrane, avereno ny membrane, apetraho eo amin'ny tanky ny sisiny (miaraka amin'ny santionany), ary ny farany misy santionany dia apetraka amin'ny electrode ratsy.
3) Electrophoresis: Ampidiro ny famatsiana herinaratra, 0.4~0.6m A/cm membrane, ny fotoana dia 30-45 min. Rehefa vita ny electrophoresis, vonoy ny herinaratra.
4) Mametafeta sy manadio: Esory ny fonon'ny tanky, ary atsobohyit ao amin'ny vahaolana fandokoana mandritra ny 5 minitra, ary avy eo dia manadio azy amin'ny vahaolana fanadiovana in-3-4 mandra-pahazavan'ny loko. Ny proteinina serum dia tokony aseho amin'ny tarika, ary amin'ny ankapobeny dia misy faritra dimy, mamorona faran'ny ambony amin'ny tsipika voamarika, Albumin, α1-gloulin, α2-gloulin, β-gloulin, γ-gloulin.
5) Fitahirizana: mametraka ny maina electrtophoresismiaramila iray tokoamin'ny vahaolana fanadiovana mandritra ny 10-15 minitra, ary avy eo dia alao ary apetaho amin'ny vera madio, rehefa maina, dia ho lasa sarimihetsika mangarahara.miaramila iray toko.
andranavokany
Ny vokatry ny fisarahana amin'ny santionany serum dia tsara, ary tsy misy tranga tailing band. Miovaova ny fiverimberenan'ny valiny noho ny fomba fitsapana sy ny fomban'ny mpanandrana, ary avo lenta ny famerenana.
Famaranana
Ny rafitra fitiliana electrophoresis klinika haingana (Electrophoresis tankDYCP-38C,herin'aratraDYY-6C sy santionany ambony loading WD-9404) novokarin'ny anayNy orinasa Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltdmahafeno ny fepetra andrana,SYny vokatra dia azo averina, tsotra ary haingana, mety amin'nyfampianaranaResearch.
Beijing LiuyiBiotechnology Co., Ltd dia manam-pahaizana manokana amin'ny famokarana vokatra elektophoresis ho an'ny indostrian'ny siansa fiainana, izaymanana tantara mihoatra ny 50 taona any Shina ary ny orinasa dia afaka manome vokatra azo antoka sy avo lenta manerana izao tontolo izao. Nandritra ny taona maro ny fampandrosoana, dia mendrika ny safidy!
Mitady mpiara-miombon'antoka amin'izao fotoana izao izahay, na ny tanky electrophoresis OEM sy ny mpaninjara dia raisina an-tanana.
Raha mila fanazavana fanampiny momba anay dia mifandraisa aminay amin'ny alàlan'ny mailaka[mailaka voaaro]na[mailaka voaaro].
Fotoana fandefasana: Nov-14-2022