Fitsipika andrana
Ny electrophoresis hemôglôbinina dia mikendry ny hamantatra sy hanamarina ny hemôglôbinina ara-dalàna sy tsy ara-dalàna.
Noho ny fiampangana samihafa sy ny teboka isoelektrique amin'ny karazana hemôglôbininy isan-karazany, amin'ny vahaolana pH buffer sasany, rehefa ambany noho ny pH an'ny vahaolana buffer ny hemôglôbininy isoelectric dia mitondra fiampangana ratsy ary mifindra mankany amin'ny anode mandritra ny electrophoresis. Mifanohitra amin'izany, ny hemôglôbinina misy fiampangana tsara dia mandroso mankany amin'ny cathode.
Eo ambanin'ny voltase sasany ary aorian'ny fotoana electrophoresis manokana, ny hemôglôbinina miaraka amin'ny fiampangana samihafa sy ny lanjan'ny molekiola dia mampiseho tari-dalana sy hafainganam-pandeha samihafa. Izany dia ahafahan'ny fisarahana faritra miavaka, ary azo atao amin'ireo faritra ireo ny famakafakana colorimetrique na electrophoretic manaraka mba hamaritana ny hemoglobinina isan-karazany. Ny fomba mahazatra indrindra dia pH 8.6 cellulose acetate membrane electrophoresis.
Ao anatin'ny cytoplasm, ny vondrona ethylene glycol (CHOH-CHOH) izay misy glycogen na polysaccharide (toy ny mucopolysaccharides, mucoproteins, glycoproteins, glycolipids, sns.) dia oksidin'ny asidra periodika ary avadika ho vondrona aldehyde (CHO-CHO). Ireo vondrona aldehyde ireo dia mitambatra amin'ny réagent Schiff mena-volomparasy tsy misy loko, mamorona loko volomparasy-mena izay mametraka ny polysaccharides ao amin'ny sela. Ity fanehoan-kevitra ity dia fantatra amin'ny hoe periodic acid-Schiff (PAS) staining, taloha antsoina hoe glycogen staining.
Fomba fanandramana
Fitaovana:Cellulose acetatemembrane, fitaovana electrophoresis(DYCP-38C sy famatsiana herinaratra DYY-6C), Fitaovana fandefasana santionany ambony (pipette), spectrophotomètre, cuvettes colorimétrique, buffers.
buffer:
(1) pH 8,6 TEB buffer: milanja 10,29 g Tris, 0,6 g EDTA, 3,2 g asidra borika, ary ampio rano voadio ho 1000 ml.
(2) Borate buffer: milanja 6,87 g borax sy 5,56 g asidra borika, ary ampio rano voadio ho 1000 ml.
fomba fiasa:
Pfanamboarana ny Hemoglobin Solution
Makà ra 3 ml misy heparin na citrate sodium ho anticoagulant. Centrifuge amin'ny 2000 rpm mandritra ny 10 minitra ary ario ny plasma. Sasao in-telo amin'ny saline ara-batana ny liomena (750 rpm, centrifugation 5 minitra isaky ny mandeha). Centrifuge amin'ny 2200 rpm mandritra ny 10 minitra ary ario ny supernatant. Ampio rano voadio mitovy, ary ampio in-0,5 heny amin'ny habetsahan'ny tetrachloride karbônina. Hozongozonina mafy mandritra ny 5 minitra, ary atsofohy amin'ny 2200 rpm mandritra ny 10 minitra mba hanangonana ny vahaolana Hb ambony ho an'ny fampiasana aoriana.
Mandehana ny Membrane
Hetezo ny fonon'ny cellulose acetate ho tapa-kazo mirefy 3 cm × 8 cm. Atsofohy ao anaty buffer pH 8.6 TEB izy ireo mandra-pahavoky tanteraka, dia esory ary kosehina amin'ny taratasy sivana.
Spotting
Mampiasà pipette hijerena 10 μl amin'ny vahaolana hemôglôbininy mitsangana eo amin'ny membrane cellulose acetate (ny lafiny marokoroko), eo amin'ny 1,5 sm eo ho eo amin'ny sisiny.
Electrophoresis
Araraka ao amin'ny efitranon'ny electrophoresis ny vahaolana borate buffer. Apetraho ny fonon'ny cellulose acetate miaraka amin'ny sisiny misy pentina eo amin'ny faran'ny cathode amin'ny efitrano. Mihazakazaka amin'ny 200 V mandritra ny 30 minitra.
Elution
Hetezo ny faritra HbA sy HbA2, apetraho ao anaty fantsona misaraka izy ireo, ary ampio rano 15 ml sy 3 ml ny rano voadio. Ahozongozona moramora mba hanesorana tanteraka ny hemôglôbinina, dia afangaro.
Colorimetry
Zero ny absorbance mampiasa rano distilled ho an'ny vahaolana elution ary mandrefy ny absorbance amin'ny 415 nm.
Kajy
HbA2(%) = Absorbance of HbA2 tube / (Absorbance of HbA tube × 5 + Absorbance of HbA2 tube) × 100%
Kajy vokatry ny fanandramana
Ny elanelana fanondro ho an'ny pH 8.6 TEB Buffer Cellulose Acetate Electrophoresis: HbA> 95%, HbA2 1% -3.1%
-tsoratra
Ny fotoana electrophoresis dia tsy tokony ho lava loatra. Ny cellulose acetate membrane dia tsy tokony ho maina mandritra ny electrophoresis. Atsaharo ny electrophoresis rehefa misaraka mazava tsara ny HbA sy HbA2. Ny electrophoresis maharitra dia mety hiteraka fiparitahan'ny tarika sy fanjavozavo.
Fadio ny mampiasa santionany be loatra. Ny ranon-javatra hemôglôbinina be loatra dia mety hitarika ho amin'ny tsy fahampian'ny tady na fandotoana tsy ampy, ka mahatonga ny fiakaran'ny HbA diso.
Misoroka ny fandotoana ny membrane cellulose acetate amin'ny proteinina.
Tsy tokony ho avo loatra ny riandrano; raha tsy izany, dia mety tsy hisaraka ny fatorana hemôglôbinina.
Ampidiro foana ny santionany avy amin'ny olon-tsotra sy ny hemôglôbininy tsy voajanahary ilaina ho fanaraha-maso.
Beijing Liuyi Biotechnology dia manamboatra tanky electrophoresis matihanina ho an'ny electrophoresis hemôglôbininy izay modelyDYCP-38Ccellulose acetate membrane electrophoresis tank, ary misy modely roa ny electrophoresis famatsiana herinaratra azo ampiasaina ho an'ny cellulose acetate membrane electrophoresis tankDYY-2CSYDYY-6Cherin'aratra.
Mandritra izany fotoana izany, Beijing Liuyi Biotechnology dia manome cellulose acetate membrane ho an'ny mpanjifa, ary ny haben'ny cellulose acetate membrane dia azo amboarina. Tongasoa eto hanontany anay momba ny santionany sy ny fampahalalana bebe kokoa.
Ny marika Beijing Liuyi dia manana tantara mihoatra ny 50 taona any Shina ary ny orinasa dia afaka manome vokatra azo antoka sy avo lenta manerana izao tontolo izao. Nandritra ny taona maro ny fampandrosoana, dia mendrika ny safidy!
Mitady mpiara-miombon'antoka amin'izao fotoana izao izahay, na ny tanky electrophoresis OEM sy ny mpaninjara dia raisina an-tanana.
Raha manana drafitra fividianana ny vokatray ianao dia aza misalasala mifandray aminay. Afaka mandefa hafatra aminay amin'ny mailaka ianao[mailaka voaaro]na[mailaka voaaro], na antsoy izahay amin'ny +86 15810650221 na ampio Whatsapp +86 15810650221, na Wechat: 15810650221
Fotoana fandefasana: Sep-20-2023