Polyacrylamide Gel Electrophoresis
Ny electrophoresis gel dia teknika fototra amin'ny laboratoara manerana ny taranja biolojika, mamela ny fisarahana ny macromolecules toy ny ADN, RNA ary proteinina.Ny fampahalalam-baovao sy ny rafitra fanasarahana samihafa dia mamela ny ampahany amin'ireo molekiola ireo hisaraka amin'ny fomba mahomby kokoa amin'ny fampiasana ny toetrany ara-batana.Ho an'ny proteinina manokana, ny electrophoresis gel polyacrylamide (PAGE) dia matetika ny teknika safidy.
PEJY dia teknika manasaraka ny macromolecules toy ny proteinina mifototra amin'ny fihetsehan'ny electrophoretic, izany hoe ny fahafahan'ny analytes mandroso mankany amin'ny electrode amin'ny fiampangana mifanohitra.Ao amin'ny PAGE, izany dia voafaritra amin'ny fiampangana, ny habeny (lanja molekiola) ary ny endriky ny molekiola.Ny analytes dia mivezivezy amin'ny pores miforona amin'ny gel polyacrylamide.Tsy toy ny ADN sy RNA, ny proteinina dia miovaova arakaraky ny asidra amino ampidirina, izay mety hisy fiantraikany amin'ny fandehany.Ny tadin'ny asidra amino dia mety hamorona rafitra faharoa izay misy fiantraikany amin'ny haben'izy ireo ary noho izany ny fomba ahafahany mivezivezy amin'ny mason-koditra.Noho izany dia mety ilaina indraindray ny denature proteinina alohan'ny electrophoresis mba hanamafisana azy ireo raha toa ka ilaina ny fanombanana marina kokoa ny habeny.
SDS PAGE
Sodium-dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis dia teknika ampiasaina hanasarahana ny molekiola proteinina misy 5 hatramin'ny 250 kDa.Ny proteinina dia misaraka fotsiny amin'ny lanjan'ny molekiolany.Sodium dodecyl sulfate, surfactant anionika, dia ampiana amin'ny fanomanana gel izay manafina ny fiampangana intrinsic amin'ny santionany proteinina ary manome azy ireo fiampangana mitovy amin'ny tahan'ny faobe.Raha lazaina amin'ny teny tsotra dia mamadika ny proteinina izy io ary manome azy ireo fiampangana ratsy.
PEJY teratany
Native PAGE dia teknika mampiasa gel tsy misy dénaturation hanasarahana proteinina.Tsy toy ny SDS PAGE, tsy misy denaturing agent ampiana amin'ny fanomanana gel.Vokatr'izany, ny fisarahana ny proteinina dia mifototra amin'ny fiampangana sy ny haben'ny proteinina.Amin'ity teknika ity, ny conformation, ny fiforitra ary ny rojo asidra amine amin'ny proteinina no antony iankinan'ny fisarahana.Ny proteinina dia tsy simba amin'ity dingana ity, ary azo averina rehefa vita ny fisarahana.
Ahoana ny fiasan'ny polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE)?
Ny fitsipika fototra amin'ny PAGE dia ny manasaraka ireo analyte amin'ny alàlan'ny fandefasana azy ireo amin'ny alàlan'ny mason'ny gel polyacrylamide amin'ny alàlan'ny herinaratra elektrika.Mba hahatratrarana izany, ny fangaro acrylamide-bisacrylamide dia polymerized (polyacrylamide) amin'ny fanampiana ny ammonium persulfate (APS).Ny fanehoan-kevitra, izay tarihin'ny tetramethylethylenediamine (TEMED), dia mamorona rafitra toy ny harato misy pores izay ahafahan'ny analytes mihetsika (sary 2).Arakaraka ny ambony ny isan-jaton'ny fitambaran'ny acrylamide tafiditra ao amin'ny gel, ny kely kokoa ny mason-koditra, noho izany ny kely kokoa ny proteinina ho afaka mandalo.Ny tahan'ny acrylamide amin'ny bisacrylamide dia hisy fiantraikany amin'ny haben'ny mason-koditra ihany koa, saingy matetika izany dia tsy miova.Ny haben'ny mason-koditra kely kokoa dia mampihena ny hafainganam-pandehan'ny proteinina kely amin'ny alàlan'ny gel, manatsara ny famahana azy ary manakana azy ireo tsy hivoaka haingana ao amin'ny buffer rehefa ampiharina.
Fitaovana ho an'ny Polyacrylamide Gel Electrophoresis
Sela Electrophoresis Gel (Tanky/Efitrano)
Ny tank gel ho an'ny electrophoresis gel polyacrylamide (PAGE) dia tsy mitovy amin'ny tank gel agarose.Ny fitoeran'ny gel agarose dia mitsivalana, raha mitsangana kosa ny tank PAGE.Amin'ny alàlan'ny sela electrophoresis mitsangana (tank/efitrano), misy gel manify (matetika 1.0mm na 1.5mm) dia arotsaka eo anelanelan'ny takelaka fitaratra roa ary apetaka mba hilentika amin'ny buffer ao anaty efitrano iray ny fanambanin'ny gel ary ny tampony dia arotsaka ao anaty buffer. amin'ny efitrano hafa.Rehefa ampiharina amin'izao fotoana izao dia misy buffer kely mifindra amin'ny alàlan'ny gel avy amin'ny efitrano ambony mankany amin'ny efitrano ambany.Miaraka amin'ny clamps matanjaka mba hiantohana ny fivorian'ny fiangonana amin'ny toerana mahitsy, ny fitaovana dia manamora ny fandehanana gel haingana miaraka amin'ny fampangatsiahana aza ka miteraka tarika miavaka.
Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd. (Liuyi Biotechnology) dia manamboatra karazana sela electrophoresis gel polyacrylamide (tanky/efitrano).Ny modely DYCZ-20C sy DYCZ-20G dia sela electrophoresis mitsangana (tanky/efitrano) ho an'ny famakafakana ny fizotry ny ADN.Ny sasany amin'ireo sela electrophoresis mitsangana (tanky / chambers) dia mifanaraka amin'ny rafitra famonoana, toy ny modely DYCZ-24DN, DYCZ-25D ary DYCZ-25E dia mifanaraka amin'ny rafitra Western Blotting modely DYCZ-40D, DYCZ-40G ary DYCZ-40F, izay ampiasaina amin'ny famindrana ny molekiola proteinina avy amin'ny gel mankany amin'ny membrane.Taorian'ny electrophoresis SDS-PAGE, ny Western Blotting dia teknika hamantarana proteinina manokana ao anaty fangaro proteinina.Azonao atao ny misafidy ireo rafitra famonoana ireo araka ny fepetra andrana.
Famatsiana herinaratra Electrophoresis
Mba hanomezana herinaratra ho an'ny fampandehanana ny gel dia mila famatsiana herinaratra electrophoresis ianao.Ao amin'ny Liuyi Biotechnology dia manome karazana famatsiana herinaratra electrophoresis izahay ho an'ny fampiharana rehetra.Ny modely DYY-12 sy DYY-12C miaraka amin'ny malefaka malefaka sy ny ankehitriny dia afaka mahafeno ny electrophoresis fepetra takiana.Manana ny fiasan'ny fijoroana, ny fotoana, ny VH ary ny fampiharana tsikelikely.Izy ireo dia mety amin'ny fampiharana electrophoresis IEF sy ADN.Ho an'ny fampiharana electrophoresis proteinina amin'ny ankapobeny sy ADN, dia manana ny modely DYY-2C, DYY-6C, DYY-10, sy ny sisa, izay mafana ihany koa ny famatsiana herinaratra amin'ny sela electrophoresis (tanky / efitrano).Ireo dia azo ampiasaina amin'ny fampiharana electrophoresis afovoany sy ambany, toy ny fampiasana laboratoara sekoly, laboratoara hopitaly sy ny sisa.Modely bebe kokoa ho an'ny famatsiana herinaratra, tsidiho azafady ny tranokalanay.
Ny marika Liuyi dia manana tantara mihoatra ny 50 taona any Shina ary ny orinasa dia afaka manome vokatra maharitra sy avo lenta manerana izao tontolo izao.Nandritra ny taona fampandrosoana, dia mendrika ny safidy!
Raha mila fanazavana fanampiny momba anay dia mifandraisa aminay amin'ny alàlan'ny mailaka[mailaka voaaro] or [mailaka voaaro].
References momba ny inona ny polyacrylamide gel electrophoresis?
1. Karen Steward PhD Polyacrylamide gel electrophoresis, ny fomba fiasan'izy io, ny karazana teknika ary ny fampiharana azy
Fotoana fandefasana: May-23-2022